（1）样品预处理：依目标分析物、样品基体和它们的保留型不同，对样品进行溶解、pH调节、离心分离、过滤、稀释和加缓冲溶液等处理。

　　（2）萃取柱的活化处理：选一种溶剂通过SPE小柱，以润湿和活化SPE填料，试分析物能与固相表面紧密接触，易于发生吸附作用，还可除去柱内可能存在的杂质，减少污染；之后还须选择一种极性和pH值与样品基体相似的溶液替换溶剂，以使样品溶液与吸附剂表面良好接触，提高萃取效率。

　　洗脱溶剂的强度选择非常关键，要达到分析物尽可能被洗脱而比分析物吸附更强的杂质仍留在SPE小柱上不被洗脱下来的效果。

　　（3）上样：将预处理好后的样品倒入活化后的SPE小柱上，然后利用加压、抽真空或离心的方式，使液体样品以适当流速通过SPE小柱。

　　（4）淋洗：选择中等强度的混ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ溶剂，尽可能洗涤除去基体重的干扰组分，又不会导致目标萃取物流失；

　　（5）洗脱：用小体积的适当的洗脱溶剂将分析物洗脱下来并收集；挥干溶剂以备用或直接在分析。

　　SPE实质上是一种液相色谱分离，所用的吸附剂也与液相色谱固定相相同，只是在粒度上有所区别。SPE的一般做法是：利用选择性吸附与选择性洗脱的色谱分离原理，使液体样品通过吸附剂，保留其中的分析物，用适当强度溶剂洗除杂质，然后用少量溶剂洗脱分析物，达到快速分离净化与浓缩的目的。也有选择性吸附干扰杂质，而让分析物洗除，或同事吸附杂质和分析物，在使用合适的溶剂选择性洗脱分析物的做法。