小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般应选用尽量少的固定相填料萃取较大体积的样品。

　　萃取前先用充满小柱的溶剂冲洗小柱或用5-10ml 溶剂冲洗滤膜使填料保持湿润, 因为填料干燥会降低样品保留值，而各小柱的干燥程度不一,也会影响回收率的重现性。

　　(4)超声15min后加入水、缓冲液, 取上清液萃取。流速应控制为1ml/min, 流速快不利于待测物与固定相结合。

　　反相SPE的清洗溶剂多为水或缓冲液, 可在清洗液中加入少量有机溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液应不超过一个小柱的容积, 而SPE滤膜为5～10ml。

　　应选用5～10ml离子强度较弱但能洗下待测物的洗脱溶剂。若需较高灵敏度, 则可先将洗脱液挥干后, 再用流动相重组残留物后进样。体内样品洗脱后多含有水, 可选用冷冻干燥法。保留能力较弱的SPE 填料可用小体积、较弱的洗脱液洗下待测物,再用极性较强的HPLC 分析柱分析洗脱物。（本文来源： 仪器网 ，转载请注明出处）

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