确定合适的分析方法→纯品试验→空白溶剂试验→空白生物基质试验→模拟生物基质试验→实验生物样品的测定(预处理→分离分析→数据处理)

　　(2)生物样品介质组成复杂,干扰多,而药物组分是微量的,必须先经过预处理,使纯化富集;

　　(4) 为了防止分析仪器的污染、劣化,提高测定灵敏度、准确度、精密度和选择性等。

　　(1)干扰杂质多(2)被测浓度低(3)供试样品量少(4)待测物的易变性(5)要求较快提供结果(6)要有一定的仪器设备(7)工作量大

　　优点:①引入干扰物质少②完全避免乳化的形成③在优化条件下,有较高的萃取率④可以用少量的样品⑤柱子可弃,无污染⑥使用的溶剂大多可以与水混合⑧易于自动化。

　　缺点:①价格昂贵②技术要求高③批与批之间有差异④柱子易阻塞,影响分离效果⑤样品需要经过预处理

　　原理:药物与干扰成分在互不相容的两相溶剂中的分配系数不同,选择性地提取生物基质中的药物。影响因素:水相pH。提取溶剂种类、离子强度。

　　提取技术:通常在戴塞的试管中进行,多半进行一次提取,用酸碱回提时也只是一次,不考虑提取尽药物。

　　原理:将样品液通过合适的固相小柱,利用药物与杂质对固相小柱亲和力的差别,用适当溶剂冲洗、洗脱,使药物得到净化。

　　步骤:(1)固相柱选择(2)固相柱处理(3)样品液上样(4)分离净化(5)待测物洗脱。

　　提取率、选择性的影响因素:(1)流速(2)样品装载量(3)固相柱使用要求(4)样品上柱前的处理。

　　①色谱分析法,对象:蛋白质,多肽等生物大分子类药物或内源性物质的检测与分析

　　②免疫分析法,对象:应用于临床TDM及生物大分子类物质的药物动力学及其相关研究

　　①短期室温稳定性②长期储存稳定性③冻融稳定性④储备液稳定性⑤待测溶液稳定性⑥样品处理过程稳定性

　　(1)药物的理化性质和存在形式(2)待测药物的浓度范围(3)药物测定的目的(4)选用的生物样品类型(5)样品预处理与分析技术的关系

　　①必须能反映浓度与药效的关系②易于获得③便于处理④根据不同目的要求选取