***仿乙醇***石油醚六号溶剂油二***甲烷Folch溶剂***仿:甲醇=2:1(v:v)B&D溶剂***仿:甲醇=1:2(v:v)Cequier-Snchez溶剂:二***甲烷:甲醇=2:1正己烷:异丙醇=3:(1)将干燥粉溶于Folch溶液中,藻粉质量和溶液比例为:1:20(g:ml).(2)对上述混合液进行涡流旋转10-30分钟。(3)以转速为6000转/分的速度离心,收集上清液,然后用与萃取液等体积的洗涤液(***仿:甲醇=1:1,v:v)洗涤三次,收集上清液,汇总。(4)离心过滤除去不溶性杂质。(5)用20ml的去离子水洗涤过滤液,收集下层的有机相。(6)蒸发溶剂。(1)超声辅助萃取:在萃取之前将萃取的对象用超声进行处理适当的时间以破壁并并粉碎细胞组织。其他步骤一致。(2)添加缓冲液:萃取液改为***仿:甲醇:磷酸缓冲液=2:1:(v:v:v),洗涤液改为***仿:甲醇:磷酸缓冲液=1:1::B&D法和Cequier-Snchez法是操作方法与Folch一致。2超临界CO2萃取介绍略3OriginOil公司专利技术图1原理图如图1所示,微藻培养成熟之后将其引入特质的管道,在管道中鼓入二氧化碳以调节pH,然后用电磁脉冲对微藻培养液进行处理,可以使细胞裂解,油脂从细胞中释放出来,然后在萃取罐中停留一段时间,从微藻细胞中释放出来的油脂利用水的浮力漂浮到水面上,可用简单方法进行收集,萃取的残液将会用作下一次微藻培养的营养液。参考文献:Extractionofoilfrommicroalgaeforbiodieselproduction:Areview4蒸汽破壁法原理如图2所示,微藻液中含水10-40倍于干燥粉,-12,然后进行通入饱和蒸汽,维持温度在110-140℃,反应时间为3到30分钟,然后进行减压冷却并进行固液分离。固液分离之后将pH调到5-7进行破乳,然后可以直接收集上层的油脂,然后继续调低下层溶液的pH至一定值使蛋白质实现等电点沉淀,以收集蛋白质。该方法较为简单,能耗较低,而且实现了油脂和蛋白质的提取。参考文献:一种同时从微藻提取油脂和蛋白质的方法(专利)5蒸汽爆破破壁法(没有提油)将湿藻置于气爆罐中,通入饱和蒸汽,使温度达到80-100℃,维持1-8Min,然后停止通入饱和蒸汽,而向罐中通入高压空气,,然后瞬间减压,破壁率达到100%。参考文献:海藻细胞壁的气爆破壁方法(专利)6二甲醚萃取图3装置如图3所示,第一个柱子中装有液化的二甲醚,在萃取柱中的下层是含有一定水分的微藻,上层是玻璃珠,第三个柱子是存储柱。方法简述:氮气将液化的二甲醚压入萃取柱中液化二甲醚在柱中萃取油脂和微藻中的物质。一定量的萃取液进入到存储柱,关闭减压柱与萃取柱的阀门,然后打开右端的减压阀,使二甲醚汽化,而使萃取物留在了存储柱中。参考文献:Simpleextractionmethodofgreencrudefromnaturalblue-greenmicroalgaebydimethylether方法原文:Thenaturalblue-greenmicro